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　　全外显子测尊龙凯时序实验步骤全外显子组测序广博使用于性命科学及农业科学商酌。微阵列芯片依据效力分类厉重有外达谱芯片全外显子测序实践举措、SNP分型芯片■及甲□基化芯片■等。微阵列芯片的典范代外是Affimatrix的“GeneChip”产物，也即是邦内赞叹的“基因芯片”或“SNP 芯片”。此类？

　　过去很长一段功夫内，邦内的 S◁…NP检 ◁ 测 芯 □片厉重以□△这类 的“固态”芯片为主全外 显子组测序，尊龙凯时人生就博正在畜牧、家禽、水产 及 作物 剖释育种检测中有着极端得胜的使用。但因为芯片开垦本钱高、行使本钱上等题目，仍旧无△法餍▽ 足新□颖 作物育种 的低本钱的需 求。

　　图2 Illumina iScan 行使芯片实行 基因型检测（图片来自汇集）！

　　靶向捕捉测序是跟着二代测序成熟后涌△现的一种低本钱高通量位点检测技■能。这项技能早期最广博的使用是正在医学商酌中的全外显子捕捉测序及遗传疾病位点检测中。正在邦际上全外显子测序实践举措，这项技能平时称之为“Targ eted genotypin g by sequ e★ncing”或“Geno▽ typing bytargets equencin g”，邦内平时称之为“靶向捕捉测序”。正在医学 根本■△商酌◁和临床检★ 测筛查中！

　　近年来跟着本钱的降落，靶向捕捉测序技能渐渐从根本医学及分子诊断界限扩展到农业育种界限。该技能正在农业育种中最初被使用于育种选育本钱较高的动物育种界限（比方畜牧、家禽、水产等），自后起先正在作○物育种与精○准判 断 中大范围的使用。外洋育种企业行使液相○捕捉测序 实行高通量的基因型判断辅助育种能够追溯到10年前。邦内的液相捕捉测序正在农业▽中的使用是近来几年才成长起来，渐渐以低本=钱上风代替固相 的SNP芯片检测。

　　正在邦内少许育种界限的△ 处事家每每行○使“液相芯片”如此的词来实行靶向测序○处事先容。厉重因为照样少许公司为了观念上的“革新”，尊龙凯时人生就博将液相捕捉技能包装成“液相芯片”来扩张。也许是近来几年“芯片”这个词太火了，什么=样 的★○产物 都 生气和芯片 扯◁上□联 系。动作脚踏实地的科研处事家，正在 分子检测▽界限应 当没有□找到“液相芯片”这个产物的适应英文词组。就坊镳前面的先容，邦际 上和■□邦内根本医学检测界限这项技能真正○广博行使并得回认同的名称是○▽靶向捕捉测序。

　　“ 液相 芯片 ”不是芯片，而是高密度的“核酸序列咸集”（仿…佛于= 高 密度引物序列），通过分子杂交的格式得 ◁回特定区域 的序列讯息。固然靶向捕捉测序（“液相芯片”）不是芯片尊龙凯时，但其感化与守旧的固△ 相SNP芯片相通，都是被用○ 于实行高通□量符号检测。

　　图4 用于杂交捕捉实践的带妆点核酸存放于试管中(“探针/Probes”)！

　　方便来说，液相芯片实在即是一管“带妆点的核酸咸集”，如上图4。通过对 DN○A模■板○ 实行带 =生物 ▽素 的扩增，即可得回“液相捕捉探针”，和众人★ 实 践室 行 使的△引物池仿佛，两者的区◁别正在序列的长度与序列是否带有▽生物素妆点。正在旧例实践中，咱们平时行使■的一对引物扩增一段序列。正在靶向捕捉测序实践中尊○龙凯时，往往★是成千上万差异○品种的序列，可能同 时与基因组差异区域实行杂交。因为核酸合成与扩增本◁钱极 端低，因而液相捕捉技能可能◁供给极端低的检测价★值。

　　须要出格提防的是，又有一种 早期广博使用的高通量 基因分型技能△叫做“Genotyping by sequencing(GBS)” 或者”Restrictio▽n site-associ=a…ted DNA se○□quencing (RAD-Seq)“简化基因△组测序技能全外显子测序实践举措。这是一类操纵酶切得回基因组片断并实行测序的技能 全外显子组测序。因为技能道理酶切的不褂讪全外显子组测序，导致这项技能位点检测的反复○性差，并不△是一种固定位点检测技能。