物芯片的本领要领， 采用相干明白的设施即全基因 组相干探求(Genome-wide○ association studies， GW…AS) 来筛选丰 富疾病易感基因， 得○到了空前绝后=的成 就。但因为 GWAS 存○正在着肯定的节制性， 同时跟着 新一代测序 本领 的■迅猛开展， 激动了全基因组○测序 和 全基因组外显子 测序的开展。本文就全基因■组外 显子测序的探 求设施及其行使作一综述。 DNA 测序、生物音○信学统计 3 个要紧次序 全外显子基因测序告诉何 如看。 2。1 目 的区域序列的富集…… 正在过去的 20 年里， 守旧的 Sanger 测序要紧是利 用 Uniplex PCR 和 Mutlip lex ▽PCR 设施富集目的区域 序列 [6]， 但其引物合成与 PCR 反响所○需用 ○度都很 高， 且实习周期长、人力资源浪费大。而新一○代测序需 要对■巨○○额外 显子举 行测序， 进而探求疾 病联系区◁域 并 SNP 验□证， 守旧的设=施不行满意这一○央浼， 正在此 靠山下， Nimb l eG○ en 公司和 安捷伦接踵○拓荒了新的 …本领以治理 这一宏大题目，尊龙凯时 为全基因组外显子测序 的遍及利用○供给了△平台。 2。1。1 NimbleGen◁ 公司的外显 子捉拿芯 片○ 罗氏 NimbleGen 推出的基于= HD2 平台 2。1M… 外 显子序列捉拿芯片[6]▽ (Sequence C apt ure 2。1M Human Exome microarr○ays)要紧是…愚弄杂交和 DNA 微阵列 本领基因区别道理来捉拿目的区域。其大致流程=是 将打断后的○基因组 DNA 与定制的序列捉拿芯片杂 交， 洗去未杂交上的片断， 随后将富集▽的目的 片断 洗脱扩增， 终末举行高通量测序。该设施具有高特○ 异性和高遮盖度全外显子基因测序告诉何如看、捉拿区域可按需打算和△◁省时省力 等便 宜 tional HapMap project)的告竣○以及高通量生物芯 片 本领的告捷研发， 人们遍及愚弄高通量全基因组生。 杂合体， 洗脱磁珠，尊龙凯时 降解 RNA 诱饵， 富集宗旨区域， 再举行高通量测序。基于 液相=序列捉拿的高通量 平 ○行靶向测序本领具有高度特异性全外显子 组基因检◁测 是□查什么的 △、高凿凿性、优异 的重现 性和遍及 的 行使前景。 2。2 2。2。1 测序△本领 守旧的测序本领 最早○的 DNA 测序本领是 1977 年 San■ge△r ★的“双 脱氧链结尾终止法”和 Maxa m 及 G□ilbe rt 的“化学降 解法”。 利 用最众 的是▽▽ Sange○r 测序法， 但这种测序仪 平常一次最众只□可同时举行 96 个或 ○384 ■个样品的测 序。Sanger 测 序本领原委 30 年的不竭开展与完竣， 现正在的测序长度可达 1 000 bp， 每一个碱○基的★读取 凿 凿率高□达 99。999%， 用度大约为 0。5 美元/=1 000 个 碱 基， 已成为测◁序的金 规范 [8]。 2。2。2 新一代测序本领(Next-generation sequ…encing) 守旧□的 Sanger 测序法无法大幅度的消浸测序费 用， 而基因变异
